論文の内容の要旨

【研究の目的】

多発性硬化症（MS）の動物実験モデルである実験的自己免疫性脳脊髄炎（EAE）マウスにインターロイキン2（IL-2）で活性化させたナチュラルキラー（NK）細胞（NK-LAK細胞）を移入し，EAEに対する効果を検討した。

【方法】

B6マウスをMOGペプチドで感作しEAEを惹起。まず，EAEマウスの中枢神経系（CNS）から単核球を分離し，その亜分画を解析。ついで，未感作マウスの脾臓由来のNK-LAK細胞をEAEマウスに投与し病勢（スコア）の変化を観察。さらに，投与されたNK-LAK細胞がCNSに移入するかどうか，EGFP遺伝子トランスジェニックマウス（グリーンマウス）由来のNK-LAK細胞を用いて解析した。

【結果】

CNS内のNK細胞数はEAEスコアと並行して増減していた。1×10⁶個のB6マウス由来のNK-LAK細胞を感作後7・14・21日に静注するとEAEスコアは抑制されたが，皮下注射や感作前日・7・14日の静注では無効だった。また，NKT-KO B6マウス由来のNK-LAK細胞の方が抑制効果は強かった。グリーンマウス由来のNK-LAK細胞はEAEマウスのCNSから検出され，感作後の時間経過とともに減少した。

【考察】

NK-LAK細胞はEAEを抑制した。その機序は末梢での液性因子放出ではなく，CNS内への移入・局所での直接の炎症抑制と思われた。局所での作用は，自己免疫性T細胞の傷害・局所に存在する抗原提示細胞の傷害・NK-LAK細胞からの神経栄養因子（NT-3やBDNFなど）の放出が考えられた。

【結論】

活性化NK細胞がEAEを抑制することが示された。これは,MSに対する細胞免疫療法として，活性化NK細胞の投与が有効な可能性を示唆する。

論文審査の結果の要旨

主査　吉田　裕樹

副査　出原　賢治

副査　長澤　浩平

本論文では，ヒトの多発性硬化症のモデルとされる実験性自己免疫性脳脊髄炎（EAE）に対して，リンホカインで活性化したNK細胞（LAK）が抑制作用を示すことを研究している。

これによると，EAEでは，臨床症状の変化と一致して脳内にリンパ球の浸潤が認められ，この一部にNK細胞が含まれている。NK細胞を除去するとEAEの悪化が見られることから，NK細胞にEAE抑制作用があることが考えられ，IL-２存在下で増殖したNK細胞を移入したところ，EAEの抑制効果が認められた。NK細胞の亜集団であるNKT細胞を持たないマウス由来の活性化NK細胞も抑制効果を示したことから，この作用はNKTではなくＮＫ細胞に依存していた。実際，移入したＮＫ細胞は，脳内に浸潤していることが確認された。

以上のデータは，リンホカイン（IL-２）により活性化したNK細胞（LAK）が，EAEや多発性硬化症に対する治療効果を持つことを示しており，意義あるものと考えられた。

よって本論文は，博士（医学）の学位論文として価値あるものと認めた。